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Les mélanges PCR bio-isothermes stimulent la quantification des cibles d'ADN

5th October 2023

PCR Biosystems, l'un des principaux développeurs de réactifs PCR, a lancé une nouvelle gamme de réactifs polymérase Bst qui offrent une sensibilité, une vitesse et une spécificité supérieures dans toutes les applications d'amplification isotherme. L'IsoFast™ Hot Start Bst Polymerase et les mélanges prêts associés utilisent la technologie exclusive de démarrage à chaud AptaLock™ pour minimiser l'amplification non spécifique, conduisant à des résultats hautement spécifiques et sensibles en aussi peu que 30 minutes. Un nouveau mélange colorimétrique permet également aux analystes de détecter visuellement les résultats, réduisant ainsi considérablement les besoins en équipements. Grâce à ces technologies, les laboratoires peuvent désormais obtenir des résultats fiables plus rapidement, permettant ainsi des tests à plus haut débit. Les mélanges isothermes sont importants dans une gamme d'applications d'amplification isotherme, notamment l'amplification du génome entier, le développement et les tests de tests au point d'intervention, et l'amplification par déplacement de brin pour la biologie synthétique. Cependant, un problème courant avec les mélanges isothermes est l'amplification non spécifique – où les amorces se lient à des cibles d'ADN involontaires – car l'amplification a souvent lieu à une température fixe, ce qui peut favoriser les interactions d'amorces non spécifiques, contrairement à la PCR. Les mélanges isothermes peuvent également conduire à la formation de dimères d'amorces, dans lesquels les amorces s'associent les unes aux autres et sont prolongées par la polymérase. Pour éviter ces problèmes, les utilisateurs doivent concevoir les amorces avec soin et évaluer beaucoup plus de paires d'amorces pour une seule cible qu'ils ne le feraient pour une PCR standard, ce qui peut être extrêmement long et complexe. Pour aider à atténuer ces préoccupations, les réactifs IsoFast™ récemment lancés par PCR Biosystems utilisent AptaLock™, une technologie de démarrage à chaud réversible qui inhibe l'activité de la polymérase en dessous de 40 °C. Ainsi, l’amplification non spécifique et la formation de dimères d’amorces sont minimisées. Une fois le mélange activé par chauffage, les résultats peuvent être obtenus en seulement une demi-heure, permettant aux analystes de réaliser une détection très sensible, spécifique et rapide des cibles ADN. Des tests à haut débit sont également possibles, car les plaques de réaction peuvent être installées à température ambiante sans aucun problème. De plus, le mélange de couleurs contient un colorant à base de pH qui change de couleur lorsque la cible souhaitée est amplifiée. En conséquence, le mélange permet aux laboratoires d’identifier visuellement les résultats positifs ou négatifs sans avoir besoin de lecteurs de plaques ou d’instruments PCR fluorométriques. Cette combinaison est donc particulièrement bénéfique pour les régions où les laboratoires d’essais sur le lieu d’intervention ou sur le terrain manquent d’installations et d’instruments adéquats. « Les mélanges isothermes existants présentent un certain nombre de défis pour les organisations recherchant la sensibilité, la spécificité et la rapidité de la détection de l'ADN », a déclaré Alex Wilson, co-fondateur et responsable du développement commercial chez PCR Biosystems. « Grâce à nos nouveaux mélanges, les laboratoires bénéficient d'une spécificité et d'une sensibilité considérablement améliorées dans leurs réactions d'amplification, ce qui leur permet d'obtenir des résultats très fiables. Nos études internes montrent qu'ils peuvent également être jusqu'à 50 % plus rapides que les mélanges concurrents sur des cibles testées, ce qui peut faire une différence cruciale pour les laboratoires de diagnostic et médicaux qui ont besoin de résultats rapides. En savoir plus sur IsoFast™ Hot Start Bst Mix et Color Mix , ou demandez un échantillon aujourd'hui. © Copyright 2010-2021 Zenopa LTD. Tous droits réservés.

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