Biotium et UC Berkeley annoncent une nouvelle étude

Biotium, l'un des principaux fournisseurs de réactifs pour les sciences de la vie et producteur de colorants innovants, a collaboré avec le professeur Ke Xu de l'Université de Californie à Berkeley pour générer une stratégie visant à améliorer le comportement de photocommutation des colorants de rhodamine pour une (d)STORM [optique stochastique (directe) microscopie de reconstruction] performance. Les deux colorants CF® à base de rhodamine et excitables par le vert produits, CF®583R et CF®597R, affichent une sensibilisation significative à la photocommutation et offrent des performances comparables à celles du colorant Alexa Fluor® 647 excité par le rouge couramment utilisé, ce qui rend les deux- Imagerie couleur tridimensionnelle (3D) possible même pour les structures difficiles. L'identification et le développement de colorants photocommutables efficaces sont au cœur de (d)STORM. Bien qu'il existe plusieurs colorants (par exemple, Alexa Fluor® 647, CF®660C et CF®680) excités par des lasers rouges qui fonctionnent convenablement pour (d)STORM, générer des colorants comparables dans d'autres canaux de couleur reste un défi. Dans une publication récente d'Angewandte Chemie, les scientifiques de Biotium ont conçu une nouvelle stratégie chimique pour générer ces colorants insaisissables. La percée a été réalisée en remplaçant le cycle benzénique dans les noyaux des colorants à base de rhodamine par l'imidazolium 1,3-disubstitué chargé en permanence pour créer le CF®583R et le CF®597R. L'imidazolium 1,3-disubstitué chargé positivement sensibilise le colorant pour le processus de photocommutation dans des conditions (d)STORM en facilitant la capture d'électrons dans un tampon réducteur contenant du thiol et la stabilisation par une structure de résonance. Sous excitation verte, les CF®583R et CF®597R ont présenté des performances (d)STORM exceptionnelles avec une commutation marche-arrêt rapide, un clignotement de longue durée et une émission lumineuse d'une seule molécule. Les auteurs ont constaté que d'autres colorants (d)STORM excités par le vert (c'est-à-dire Alexa Fluor® 532, Cy3B, Attoâ ¢ 565 et Alexa Fluor® 568) présentaient une photocommutation très limitée sous la même puissance d'excitation, les deux derniers ne produisant aucun résultat perceptible. changements spectraux. Dans cette publication récente d'Angewandte Chemie, les auteurs, Wang et al., ont démontré l'utilisation du CF®583R et du CF®597R dans une imagerie 3D-(d)STORM bicolore de haute qualité et d'excellente qualité de la structure complexe de l'actine. cytosquelettes. "En travaillant en étroite collaboration avec les chimistes de Biotium et en communiquant les propriétés chimiques idéales nécessaires pour des colorants STORM optimaux, notre collaboration a pu produire un cadre pour développer davantage de couleurs fluorescentes qui élargissent la palette de couleurs pour l'imagerie STORM multicolore", déclare Ke Xu PhD, professeur agrégé de chimie à l'UC Berkeley. "Bien qu'il y ait eu récemment des progrès significatifs dans l'imagerie et les applications STORM, les travaux visant à améliorer les sondes chimiques pour les colorants excités par le vert pour les lasers 532-561 nm ont fait défaut", déclare Wai-Yee Leung PhD, vice-président de la recherche et du développement chez Biotium. "Nous sommes fiers d'offrir de nouveaux réactifs pour l'imagerie multiplex à l'appui de ce domaine passionnant.â Biotium continue d'aider à déplacer le domaine dans de nouvelles directions passionnantes en généralisant le concept et l'approche décrite dans cette publication à d'autres rhodamines et structures de colorant pour créer un palette étendue pour (d)STORM. Les colorants à base de rhodamine existants pour STORM, y compris CF®583R et CF®597R, peuvent être achetés via Biotium sous forme d'anticorps secondaires à marquage unique, d'esters succinimidyl réactifs aux amines ou de Mix-n-Stain™ Kits de marquage d'anticorps colorants STORM CF® De plus, le CF®583R est également disponible sous forme de conjugués de phalloïdine et d'annexine V.